Najvažnije delatnosti VSI Kraljevo obuhvataju:
° U oblasti zaštite životinja: pripremu i realizaciju mera preventive, laboratorijsku dijagnostiku, rano otkrivanje, praćenje, suzbijanje i iskorenjivanje zaraznih i parazitskih bolesti životinja, a posebno zoonoza,
° U oblasti kontrole namirnica životinjskog porekla, hrane za životinje i vode: laboratorijsku kontrolu higijenske ispravnosti i kvaliteta sirovina, proizvoda životinjskog porekla, hrane za životinje i vode, površinskih i otpadnih voda,
° Zaštitu životne sredine i veterinarsku sanitaciju (dezinfekciju, dezinsekciju, deratizaciju),
° Preventivu i lečenje steriliteta životinja i
° Promet veterinarskih lekova, vakcine i opreme.
Navedene delatnosti VSI Kraljevo obavlja na području 25 opština jugo-zapadne Srbije (Raški, Rasinski, Moravički i Zlatiborski upravni okrug), koji je dominantno brdsko-planinski. Teritorija ovih opština iznosi približno 15.000 km2 površine, sa oko 1.000.000 stanovnika, na kojoj se nalazi između 20% i 30% stočnog fonda Republike Srbije, u zavisnosti od vrste životinja.
Na epizootiološkim područjima VSI Kraljevo nalazi se raznovrstan i brojan stočni fond. Na osnovu podataka Republičkog zavoda za statistiku iz 2002. godine, kao i podataka veterinarske službe, na ovom području ima oko 200045 goveda, 462692 ovaca, 230482 svinja, 1397994 živinem 138900 pasa i 30700 konja.
Na ovom prostoru, posebno je značajna živinarska i ovčarska proizvodnja, a na teritoriji pojedinih opština i govedarska i svinjarska.
